DETECTION OF BETA-GLOBIN GENE FRAGMENTUSING POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)TECHNIQUE AND TRIAL FOR ITS CLONING

	DETECTION OF BETA-GLOBIN GENE FRAGMENTUSING POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)TECHNIQUE AND TRIAL FOR ITS CLONING
Iraqi Journal of Biotechnology
Article 1, Volume 9, Issue 4, 2010, Pages 741-752
Abstract
الخلاصةBeta من أجل تعقب جين الجلوبين بيتا Human genomic library بنيت مكتبة وراثية بشريةبإ ستعمال Kb 21 كيلو قاعدة - بحجم يتراوح بين 18 DNA بإستعمال قطع حامض نووي globin geneالتي أستعملت بحيوية قدرها Competent E. coli HB و البكتريا المؤهلة 101 pBR البلازميد 322710 خلية و بكفاءة x 1010 خلية/مليلتر. بلغ حجم المكتبة الوراثية البشرية التي تم بناؤها 4.25 x4.5% أستنسال عالية بلغت 84.70 % . كما كانت نسبة المستعمرات البكتيرية ذات البلازميدات الهجينة 0.08810 خلية / 0.2 x 1010 خلية ) التي بلغت كفاءة التحول فيها 2.12 x من عدد البكتريا المؤهلة الحية ( 4.5x أن حجم المكتبة الوراثية البشرية التي تم بناؤها يساوي 4.25 .DNA مايكروغرام من الحامض النووي510 خلية اللازمة لوجود جين x 710 خلية وهو أكبر من حجم المكتبة الوراثية المفترض أنشاؤها 1.4الجلوبين بيتا بأحتمالية 95 %. أستخلص أكثر من 120 عينة حامض نووي بلازميدي هجين من المكتبةPolymerase chain الوراثية من أجل تعقب جين الجلوبين بيتا بإستعمال تقنية تفاعل سلسلة البوليميريزبينت نتائج هذا التفاعل بوجود . IVSI-6N و Cod-39N وأستعمال بادئتين للموقعين reaction-PCRفي عينة واحدة من عينات البلازميدات الهجينة فيما فشلت جميع Cod-39N نتيجة إيجابية مع الموقعمما يؤكد بأن قطعة الحامض النووي البشرية IVSI-6N العينات الأخرى في الحصول على نتيجة مع الموقعلا تحتوي على جين الجلوبين بيتا كاملا. كما لا يعرف بالضبط فيما أذا Cod-39N التي تم فيها تعقب الموقعكانت هذه القطعة تحتوي على مواقع أخرى لنفس الجين مما يتطلب أستعمال أعداد أخرى من المواقع للتأكد
Keywords
Beta globin gene; Cloning; PCR; coli; pBR

Statistics Article View: 14 PDF Download: 3